巴氏染色液EA染色液使用說明書

上海科匯生物技術有限企業EA50染色液使用說明書【產品名稱】EA50染色液【產品編號】EA50-OT-100，EA50-OT-500，EA50-OT-1L，EA50-OT-2.5L【包裝規格】100ml500ml1000ml2500mL【預期用途】細胞質染色試劑，用于Papanicolaou染色法細胞學上使用的對照染料【查驗原理】EA50染色液,Pap3B試劑為伊紅Y和亮綠SF酸（加入了磷鎢酸，PTA）染液的酒精溶液。Papanicolaou染色，第一用蘇木素將細胞核染色，以后用OG-6試劑和EA試劑持續染色。橘黃G染料對細胞質染色，并保持在成熟細胞和角質化細胞。以后的EA試劑對未染色的細胞組分染色，如鱗狀細胞，核仁，纖毛，紅細胞。測試樣本可為婦科細胞樣本和非婦科細胞樣本，如痰液，尿液，細胞穿刺等。為獲取優良的染色成效，EA50Pap3B試劑特征與KOHYPATH其余用于細胞學涂片染色試劑（蘇木素HP，Pap1A試劑，OG-6，Pap2A試劑）符合。【主要構成成分】含生物染料級別（BSC）的伊紅Y和亮綠SF，并增添磷鎢酸和適合的穩固劑，二者濃度和比率不一樣于其余EAPap試劑。細胞學涂片染色：采集和準備細胞學資料的兩種方法：采集細胞學樣本后置于載玻片（VitroGnost）上，立刻噴灑固定液（CitoSpray）進行固定，干燥后染色備用。樣本固定后可擱置于95%乙醇（Histanol95）中30min。用液體基質的細胞學方法（LBC），刷子刷下細胞學樣本，立刻浸入固定液（CitoFix）固定。染色前，從固定液中分別樣本細胞（離心固定液），置于載玻片上，準備進一步染色。巴氏（Papanicolaou）染色法，進行性染色：染色以前，樣本資料應采集并固定于載玻片上。如樣本已經用CitoSpray固定并干燥，應擱置于95%乙醇（Histanol95）中10min，以去除聚乙二醇；若樣本是經95%乙醇（Histanol95）溶液固定，請忽視此步驟。細胞學樣本染色過程中（用LBC法），包括低濃度乙醇，所以無需用遞減梯度的乙醇進行水化。后續用蘇木素HP，Pap1A染色。1.遞減梯度濃度乙醇溶液（Histanol95,Histanol80andHistanol70）水化，并用蒸餾水或去離4組，每次上下跌落6-8次子水沖刷2.蘇木素HP，Pap1A染色2-3min3.Scott溶液或顯藍試劑辦理1min注：若沒有此試劑，可直接用自來水沖刷3-5min4.遞加梯度濃度乙醇溶液（Histanol70,Histanol3組，每組上下跌落6-8次80andHistanol95）進行脫水5.OG-6，Pap2A染色2-3min6.95%乙醇（Histanol95）沖刷2次，每次上下跌落6-8次7.EA31，Pap3A試劑染色/EA50，Pap3B試2-3min上海科匯生物技術有限企業劑染色8.95%乙醇（Histanol95）沖刷上下跌落6-8次9.100%乙醇（Histanol100）脫水上下跌落6-8次10.100%乙醇（Histanol100）脫水3-5min11.二甲苯（BioClear）或其代替物（BioClearNew）上下跌落6-8次透明辦理12.二甲苯（BioClear）或其代替物（BioClearNew）3-5min透明辦理透明化辦理后應?即?適合的封?劑進?封?。假如使??甲苯（BioClear）透明化，對應使?KOHYPATH?甲苯基質的封?劑（BioMount，BioMountHigh，BioMountM，BioMountDPX，BioMountC，或一般BioMount）；假如是由?甲苯代替物（BioClearNew）透明化，使?BioMountNew封?。使?蓋玻片覆蓋。注意事項：為防?蘇木素HP，Pap1A溶液積淀和表?形成?屬光彩飄蕩物，使?前過濾辦理。染色時間為非標準化、固定化，需要依據臨床和實驗經驗來調控。建議的操作方法是依據KOHYPATH試劑的特征和長時間的臨床和實驗經驗。染色強度依據染色時間而定，實質染色操作需依據詳細實驗需求確立。在切合細胞學技術操作的前提下，染色流程可依據個人實驗需求改變。巴氏（Papanicolaou）染色法，退行性染色：退行性染色法使樣本染色后更為簡單劃分，細胞核構造更為清楚。染色以前，樣本資料應采集并固定于載玻片上。如樣本已經用CitoSpray固定并干燥，應擱置于95%乙醇（Histanol95）中10min，以去除聚乙二醇；若樣本是經95%乙醇（Histanol95）溶液固定，請忽視此步驟。細胞學樣本染色過程中（用LBC法），包括低濃度乙醇，所以無需用降低梯度的乙醇進行水化。后續用蘇木素HP，Pap1A染色。1.遞減的梯度濃度乙醇溶液（Histanol95,4組，每次上下跌落6-8Histanol80andHistanol70）水化，并用蒸次餾水或去離子水沖刷2.蘇木素HP，Pap1A染色6min3.蒸餾水或去離子水沖刷上下跌落6-8次4.HCLPap溶液或0.1%HCl溶液分化辦理5-10s注：此步驟可去除細胞核和細胞質上過多的蘇木素染液，但分化時間過長會使細胞核發生褪色。5.蒸餾水沖刷上下跌落6-8次6.Scott溶液或顯藍試劑辦理1min注：若沒有此試劑，可直接用自來水沖刷3-5min7.遞加梯度濃度乙醇溶液（Histanol70,3組，每組上下跌落6-8Histanol80andHistanol95）進行脫水次8.OG-6，Pap2A染色3min上海科匯生物技術有限企業9.95%乙醇（Histanol95）沖刷2次，每次上下跌落6-8次10.EA31，Pap3A試劑染色/EA50，Pap3B試劑染色3min11.95%乙醇（Histanol95）沖刷上下跌落6-8次12.100%乙醇（Histanol100）脫水上下跌落6-8次13.100%乙醇（Histanol100）脫水3-5min14.二甲苯（BioClear）或其代替物（BioClearNew）次透明辦理上下跌落6-815.二甲苯（BioClear）或其代替物（BioClearNew）3-5min透明辦理透明化辦理后應立刻用適合的封?劑進?封?。假如使用二甲苯（BioClear）透明化，對應使?二甲苯基質的封?劑（BioMount，BioMountHigh，BioMountM，BioMountDPX，BioMountC，或一般BioMount）；假如是由二甲苯代替物（BioClearNew）透明化，使?環保封片劑BioMountNew進行封?。使?蓋玻片覆蓋。注意事項：為防?蘇木素HP溶液積淀和表?形成?屬光彩飄蕩物，使?前過濾辦理。染色時間為非標準化、固定化，需要依據臨床和實驗經驗來調控。建議的操作方法是依據KOHYPATH試劑的特征和長時間的臨床和實驗經驗而整理的染色強度依據染色時間而定，實質染色操作需依據詳細實驗需求確立。在切合細胞學技術操作的前提下，染色流程可依據個人實驗需求改變。染色結果：藍色—細胞核黃色至橙色—角質化細胞粉色至紅色—表皮鱗狀細胞，紅細胞，核仁，纖毛綠色—其余細胞胞質（副基底和中層鱗狀細胞，柱狀細胞，多核細胞白細胞，淋巴細胞，組織細胞，腺癌細胞及未分化癌細胞）【儲藏條件及有效期】保證產品包裝完好的狀況下，儲藏溫度在+15°C和+25°C之間。保持儲藏環境干燥，不要擱置于嚴寒的環境中，不要冷凍產品，防止直接陽光直射。產品使用效期為2年，詳細效期見標簽。【合用儀器】不合用【樣本要求】使用適合的設施儀器采集組織樣本，并標志清楚，依據操作說明進行實驗。為防止發生錯誤，染色及診療過程最好由具有關專業知識的技術人員操作。依據標準醫療診療實驗室標準鏡檢診療。【參照文件】上海科匯生物技術有限企業1.Papanicolaou,G.N.(1941):Someimprovedmethodsforstainingvaginalsmears.JLabClinMed.2.Papanicolaou,G.N.(1942):Anewprocedureforstainingvaginalsmears.Science.3.