G -B- 17378.7-2007 海洋監測規范 第7部分 近海污染生態調查和生物監測(正式版)_第1頁
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A45中華人民共和國國家標準海洋監測規范第7部分:近海污染生態調查和生物監測Thespecificationformarinemonitoring—part7:EcologicalsurveyforoffshorepollutionandbiologicalmonitoringⅠ3室內標本處理163室內標本處理16前言 2規范性引用文件 3術語和定義 4一般規定 5浮游生物生態調查 .51調查內容和方法 .. ..53樣品整理與分析 .6大型底棲生物生態調查 .61調查內容和方法 .. ..64資料整理與保存 .7潮間帶生物生態調查 .71調查內容和方法 . 73室內標本整理鑒定和保存 . .8葉綠素-a的測定 8.1熒光分光光度法 .82分光光度法 .9糞大腸菌群檢測 10細菌總數測定 . .10.2熒光顯微鏡直接計數法 11生物毒性試驗 12魚類回避反應實驗 13濾食率測定 赤潮毒素—麻痹性貝毒的檢測 15海水增養殖區監測 附錄A(規范性附錄)記錄表 附錄B(資料性附錄)污染生態調查資料常用評述方法 附錄D(規范性附錄)弧菌數附錄C(資料性附錄)受試動物的親體產卵和幼蟲階段培養條件 附錄D(規范性附錄)弧菌數量檢測—平板計數法 Ⅱ附錄E(規范性附錄)沉積物糞大腸菌群數—發酵法 附錄F(規范性附錄)沉積物異養細菌總數—平板計數法 附錄G(資料性附錄)異養細菌總數評價等級 附錄H(規范性附錄)水質、沉積物質量評價資料匯總 附錄I(規范性附錄)海水增養殖區監測報告內容與格式 表1淺水Ⅰ型浮游生物網規格 表2淺水Ⅱ型浮游生物網規格 表3淺水Ⅲ型浮游生物網規格 表4內標簽式樣 表5采泥標簽 表6拖網標簽 表7定量標簽 表8定性標簽 表9大腸菌群檢數表 表10百分率與概率單位換算表 表11小白鼠死亡時間與鼠單位關系表 表12水質監測項目分析方法 表13沉積物監測項目分析方法 表14有機污染評價分級表 表A.1浮游生物采集記錄表 表A.2浮游動物垂直分層拖網采集記錄表 表A.3浮游生物標本登記表 表A.4浮游植物細胞數量計數記錄表 表A.5浮游動物生物量測定表 表A.6型浮游動物個體計數記錄表 表A.7夜光藻數量計數記錄表 表A.8浮游植物數量統計表 表A.9浮游動物數量統計表 表A.10大型底棲生物海上采集記錄表 表A.11主要種的各種生物學參數 表A.12大型底棲生物定量采集記錄表 表A.13大型底棲生物定性采集記錄表 表A.14大型底棲生物密度統計表 表A.15大型底棲生物生物量統計表 表A.16大型底棲生物采集種類分布表 表A.17大型底棲生物定性采集種類分布表 表A.18潮間帶生物野外采集記錄表 表A.19潮間帶生物定量采集記錄表 表A.20潮間帶生物定性采集記錄表 表A.21潮間帶主要生物類群種類組成統計表 表A.22潮間帶生物定量種類分布表 表A.23葉綠素a熒光分光光度法測定記錄表 Ⅲ表A.24葉綠素a、b、c分光光度法測定記錄表 表A.25糞大腸菌群記錄表(發酵法) 表A.26糞大腸菌群記錄表(濾膜法) 表A.27細菌平板計數記錄表 表A.28熒光顯微鏡直接計數海洋細菌總數記錄表 表A.29毒性試驗記錄表 表A.30毒性試驗數據統計換算登記表 表A.31魚類回避反應實驗記錄表 表A.32濾食實驗記錄表 表A.33污染水樣檢測記錄表 表A.34貝類赤潮毒素的毒性檢測記錄表 表A.35海水增養殖區水質監測結果報表 表A.36海水增養殖區沉積物監測結果報表 表A.37浮游植物細胞數量計數記錄表 表C.1受試動物的親體產卵及幼蟲培養條件 表G.1異養細菌總數評價等級表 表H.1水質各項污染因子的污染指數報表 表H.2沉積物各項污染因子的污染指數 表H.3水質營養指數 表H.4水質有機污染評價指數 表H.5水質營養狀態質量指數 Ⅴ本部分的全部技術內容為強制性。—第2部分:數據處理與分析質量控制;—第7部分:近海污染生態調查和生物監測。態調查和生物監測》。本部分與GB17378.7—1998相比主要變化如下:—增加了記錄表(見附錄A);附錄B);—將受“試動物的親體產卵和幼蟲階段的培養條件”調整為資料性附錄(1998年版的附錄B;本版的附錄C);—增加了“弧菌數量檢測—平板計數法”(見附錄D);—增加了“沉積物糞大腸菌群數—發酵法”(見附錄E);—增加了“沉積物異養細菌總數—平板計數法”(見附錄F);—增加了“異養細菌總數評價等級”(見附錄G);—增加了“海水增養殖區監測報告內容與格式”(見附錄I)。為資料性附錄。本部分由國家海洋局提出。本部分由全國海洋標準化技術委員會(SAC/TC283)歸口。本部分起草單位:國家海洋環境監測中心。本部分所代替標準的歷次版本發布情況為:1海洋監測規范第7部分:近海污染生態調查和生物監測GB17378的本部分規定了近海污染生態調查和生物監測的樣品采集、實驗、分析、資料整理等方法的技術要求。本部分適用于近海環境污染的生物學調查、監測和評價。2規范性引用文件件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本部分,然而,鼓勵根據本部分達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件部分。GB3097—1997海水水質標準GB/T12763.4海洋調查規范GB17378.2海洋監測規范第2部分:數據處理與分析質量控制GB17378.5海洋監測規范GB17378.6海洋監測規范GB18668—2002海洋沉積物質量3術語和定義下列術語和定義適用于GB17378的本部分。浮游生物plankton體型細小懸浮于水層中,無或僅有微弱游泳能力隨水流移動的水生生物。大型底棲生物macrobenhthos底棲生物的一類,不能通過0.5mm孔徑網篩的底棲生物。大型浮游生物macroplankton個體在(5~10)mm之間的浮游生物。水母、大型橈足類、磷蝦類、櫻蝦類、被囊類、毛顎動物、翼足類軟體動物和異足類軟體動物等的統稱。指標生物indexorganism對某種污染物質有很強的忍受能力或對某種污染物敏感的生物種類。2毒性試驗toxicitytest將生物體置于試驗條件下,施加污染物的影響,然后觀察、測定生物異常或死亡效應,包括急性、亞急性、慢性毒性試驗。試液testsolution用作毒性試驗的毒物溶液或排污口水樣的不同濃度的稀釋液。稀釋度dilution受試生物testorganism用作毒性試驗的生物。受試驗時間testingtime受試生物直接接觸試液的起止時間范圍。半數致死濃度halflethalconcentration在一定觀察期內,造成50%的受試生物死亡的毒物濃度。半數效應濃度halfeffectconcentration在一定觀察期內,導致50%的受試生物出現某種異常反應(如回避、攝食率和呼吸率改變、平衡喪失等)的毒物濃度。4一般規定4.1近岸污染生態調查近岸污染生態調查內容如下:—浮游生物生態調查;—大型底棲生物生態調查;—潮間帶生物生態調查。生物監測內容如下:—葉綠素a;—糞大腸菌群;—細菌總數;—生物毒性試驗;—魚類回避反應實驗;—濾食率測定;—赤潮毒素—麻痹性貝毒的檢測。4.3調查和監測項目的選擇近岸污染生態調查和監測項目選擇應遵循以下原則:—在調查和監測中,應依據目的、任務和性質考慮生物調查和監測的內容。通常,在基線(背景)調查和環境質量綜合評價中,浮游生物生態調查、大型底棲生物生態調查、潮間帶生物生態調3查、葉綠素a、糞大腸菌群和細菌總數等是應測項目;—在危害調查和排污口、傾廢區、海上石油開發區等的監視監測中,應選測生物毒性試驗、魚類回避反應實驗和濾食率測定等項目;—赤潮毒素(麻痹性貝毒)的檢測,應在赤潮發生區和赤潮多發季節定期監測,或發現可疑的麻痹性貝毒(PSP)中毒事件時應用;—運用污染生態調查資料常用評述方法(參見附錄B)時應慎重,應比較幾種方法所得的結果,并與傳統的生態描述方法結合,進行綜合分析;—幾種受試動物的親體產卵和幼蟲階段培養條件(參見附錄C),因生物地區性很強,各地用其進行毒性試驗時,應進行必要的試養;—在生物監測中,對生物體內污染物質累積量的測定,也是主要內容之一。其分析測定方法見5浮游生物生態調查5.1調查內容和方法調查浮游植物的種類組成和數量分布;浮游動物的生物量、種類組成和數量分布。根據污染調查的目的、類型及污染源的性質,確定調查和監測項目。赤潮的環境調查和監測,特別掌握調查海域浮游生物的種類組成、數量分布、季節變化等生態學現狀,為調查海域的污染生態監測和評價,提供背景資料。調查站位的布設應與環境監測設站相一致。若站位較密,工作量太大,浮游生物可考慮間隔站取樣。調查時間每月一次,根據需要于大潮期和小潮期間進行。掌握污染海域,尤其是赤潮頻發區的浮游生物(特別是赤潮生物種)的動態及其與環境的關系。通過長期資料積累,為環境和赤潮的預測、預報做好必要的準備工作。此類調查,站位布設不宜過多,可在現狀調查的基礎上,選擇若干“熱點”設站定期取樣分析。一旦發現異常,應密切注意其動向,適當增加調查次數,并按現狀調查的站位,進行一次較全面的調查。每月大潮期間進行一次,在赤潮常發期(4月~10月5d調查監測一次,并設置對照測站。應急跟蹤調查是在發生突發性污染事故(如溢油)或發生赤潮時所采取的應急性行動。調查、監測應盡快趕赴現場取樣,并持續到直觀跡象消失。每天或隔天采樣一次。站位布設應根據污染或赤潮發生范圍,按梯度變化酌情而定。同時應在事故范圍之外,選取1個~2個站作為對照。浮游植物調查,一般只需采水樣。測站水深在15m以內的淺海,采表、底兩層;水深大于15m的有必要進行晝夜連續觀測時,可每間隔2h或3h按上述層次采樣一次。通常用于浮游動物采樣。浮游植物拖網采樣,可考慮在需要詳細分析種類組成時采用。一般使用4規定的網具自海底至水面作垂直拖網采樣。若需了解其垂直分布,可按5m~0m、10m~5m、底至10m等層次作垂直分層拖網。若需進行晝夜連續觀測,應與浮游植物采水樣的時間間隔一致。以下為浮游植物樣品常用采水器:—顛倒采水器;—卡蓋式采水器。使用以下類型的網具:—淺水Ⅰ型浮游生物網:用于采集大型浮游動物及魚卵、仔稚魚等。規格見表1;—淺水Ⅱ型浮游生物網:用于采集中、小型浮游動物。規格見表2;—淺水Ⅲ型浮游生物網:用于采集浮游植物樣品,供分析種類組成時采用。規格見表3。表1淺水Ⅰ型浮游生物網規格部位內徑50cm,網口面積0.20m2,網圈用直徑10mm的圓鋼條過濾部1長5cm,細帆布2網底部3直徑9cm,長5cm,細帆布全長表2淺水Ⅱ型浮游生物網規格部位頭錐部1長35cm,細帆布,中圈直徑50cm,網圈用直徑10mm的圓鋼條過濾部2網底部3直徑9cm,長5cm,細帆布全長表3淺水Ⅲ型浮游生物網規格部位內徑37cm,網口面積0.1m2,網圈用直徑10mm的圓鋼條過濾部1長5cm,細帆布2長130cm,JF62或JP80篩絹網底部3直徑9cm,長5cm,細帆布全長一致。分層采集時控制浮游生物網網口關閉的裝置。5測量浮游生物網濾水量裝置,使用時安裝于網口半徑的中點,通過水流驅動其葉輪轉動,記錄器記錄轉數,經必要的換算,可求出流經網具的實際水量。未經檢定的流量計,使用前應檢定或在平靜海區經現場標定后方可使用。標定方法是將流量計按實際使用時的位置,安裝在不帶網衣的網圈上,并按實際采樣時的拖網速度從一定深度(10m或30m)垂直拖至表層,記錄其轉數。如此反復5次~10次,取得平均值,再計算每轉的流量,則為流量計標定值。此值至少需保留三位有效數字。以下設備為船上常備設備:—絞車、吊桿及鋼絲繩:絞車應配有變速(0.3m/s~1.5m/s)排纜裝置和計數器的電動絞車。若缺乏該設備,可用建筑用的升降機或手搖絞車代替。鋼線繩直徑一般為4.8mm左右。吊桿安裝需高出船舷3m,跨舷距約1m;—照明設備。裝箱上船并放于適當位置,避免撞擊和丟失;5.2.2.1.2認真檢查船上設備是否運轉正常,若遇故障,應及時排除或更換;浮游植物用碘液固定。其配制方法是將碘片(I2)溶于5%的碘化鉀(KI)溶液中,使成飽和溶液。需要量按每升水樣加該碘液6mL~8mL準備。浮游動物用5%甲醛固定。不必事先配制,只須按標本瓶容量的5%左右加入甲醛溶液即可。5.2.2.2.1采集人員應提前到達工作崗位,再次檢查網具及其附件、記錄表及其他有關配備是否完善,發現問題及時處理;5.2.2.2.2船只到站時,應先核對站位,待船停穩后,測其實際水深,確定采樣層次及鋼絲繩應放長度。浮游植物水樣采集應按以下要求進行:—用顛倒采水器或卡蓋式采水器,其使用方法及操作步驟與水質項目采樣相同;—采樣層次視調查需要、計劃規定和海區各站實際水深而定;—水樣采集務必與葉綠素a和水質項目的采水同步進行;—所需水樣量一般為500mL;—采樣后,應及時按每升水樣加6mL~8mL碘液固定。分別用淺水Ⅰ、Ⅱ型浮游生物網自底至表垂直拖曳采集浮游動物。若需網采浮游植物,則用淺水Ⅲ型網。其操作步驟如下:—每次下網前應檢查網具有否破損,發現破損應及時修補或更換網衣;檢查網底管和流量計是否處于正常狀態,并把流量計指針撥至指零;放網入水,當網口貼近水面時,需調整計數器指針于零的位置;網口入水后,下網速度一般不能超過1m/s,以鋼絲繩保持緊直為準;當網具接近海底時,絞車應減速,當沉錘著底,鋼絲繩出現松弛時,應立即停車,記下繩長;—網具到達海底后可立即起網,速度保持在0.5m/s左右;網口未露出水面前不可停車;網口離6開水面時應減速并及時停車,謹防網具碰刮船底或卡環碰撞滑輪,使鋼絲繩絞斷,網具失落;—把網升至適當高度,用沖水設備自上而下反復沖洗網衣外表面(切勿使沖洗的海水進入網口使粘附于網上的標本集中于網底管內;將網收入甲板,開啟網底管活門,把標本裝入標本瓶,再關閉網底管活門,用洗耳球吸水沖洗篩絹套,如此反復多次,直至殘留標本全部收入標本瓶中;—按樣品體積的5%,加入甲醛溶液進行固定。分層采集,應在網具上裝置閉鎖器,按規定層次逐一采樣。操作步驟為:—下網前應使網具、閉鎖器、鋼絲繩、攔腰繩等處于正常采樣狀態,下網時按垂直拖網方法;—網具降至預定采樣水層下界時應立即起網,速度如垂直拖網;當網將達采樣水層上界時,應減慢速度(避免停車,以防樣品的外溢提前打下使錘(提前量每10m水深約1m);當鋼絲繩出現瞬間松弛或振動時,說明網已關閉(記錄此時的繩長可適當加快起網速度直至網具露出水面;之后,將閉鎖狀態的網具恢復成采樣狀態,并按垂直拖網法沖網和收集、固定標本;—各項樣品采樣完畢,應及時將采樣記錄詳細記入表A.1或表A.2。采樣后應進行以下工作:—所有樣品應裝入牢固的標本箱內搬運;—用過的網具、閉鎖器和流量計等需用淡水沖洗,晾干后收藏;采樣時應注意以下事項:—遇傾角超過45°時,應加重沉錘重新采樣;—遇網口刮船底或海底,應重新采樣。5.3樣品整理與分析根據采樣記錄表,認真核對采取的全部樣品,若發現不符應及時查找原因,不得任意更改原始記錄。依據海上采樣記錄,按序對各類樣品進行總編號,并記入表A.3中。總編號力求簡明,由能表示樣品的采樣海區、采集方式、采集網具、采集年份及標本序號的字母或代號表示,其規定如下:—采集海區:用調查海區漢語拼音第一個字母表示;—Ⅰ表示淺水Ⅰ型浮游生物網垂直拖網樣品;—Ⅱ表示淺水Ⅱ型浮游生物網垂直拖網樣品;—Ⅲ表示淺水Ⅲ型浮游生物網垂直拖網樣品;—L表示晝夜連續觀測樣品;—ch表示垂直分層采集樣品;—S表示浮游植物采水樣品;—年份用阿拉伯數字表示。按以下要求對采集的樣品貼標簽:—外標簽:按總編號順序編寫,貼于各號標本瓶外,并涂臘或樹脂保護;7表4內標簽式樣年月日站號海上編號5.3.2浮游植物樣品的處理與分析浮游植物水樣的種類鑒定與計數,一般需按采樣層次逐一分析。若時間不允許,在不影響計劃要求前提下,可采用混合樣計數,即各層取等量(50mL或100mL)混合,再按下述方法處理和分析。使用的主要儀器和設備如下:—倒置顯微鏡;100mL等不同容量。若無上述沉降器,可自己制作簡易沉降器,只需取內徑為25mm(外徑10mL),可制作其他規格的簡易沉降器,但使用前需對其容積和底面積進行準確標定,并逐一編號;—蓋玻片; —計數器。每個水樣取三個分樣計數,取平均值。計數操作過程如下:—取三個等容量的沉降器,分別注滿經搖勻的水樣,蓋上蓋玻片使不留氣泡,靜置24h以上。分樣體積大小需視水樣渾濁度和浮游植物的豐度而定;可一次性準備幾個待計數的樣品;—輕移上述沉降器于倒置顯微鏡下鑒定、計數。浮游植物數量較少時,應計全數;—若數量較大或計數微型藻類時,可于高倍鏡下計算一定面積上的細胞數,再依所計面積,換算為整個底面積上的總細胞數;儀器和設備如下:—顯微鏡;—計數框:取0.25mm厚的蓋玻片,切割成細條狀(寬約2.5mm),粘貼于普通載玻片上,務使框—取樣管;可直接采用0.25mL的微型注射針筒,或取2mL分析用的移液管,截去上端,磨平,并裝上小橡皮球即成;每份水樣計數三個分樣,取平均值。按以下步驟操作:—將待計數水樣搖勻,準確吸取0.25mL置于計數框內,蓋上蓋玻片使不留氣泡;—移計數框于顯微鏡下鑒定計數。通常應按序計全數,若數量大,可考慮間行計數(若水樣為未加固定劑的新鮮海水,計數前應向框內噴射少許醋酸蒸汽8—本法適于赤潮發生期間或浮游植物細胞數量達每升105個以上時的計數;—將計數結果記入表A.4中。按以下步驟操作:—將靜置24h以上的水樣,用包扎有JF62或JP80號篩絹的吸管,輕輕吸去上清液,使水樣濃縮至10mL。濃縮時切勿攪動沉淀樣品,否則需重新靜置24h后再濃縮。通常一次不可能濃縮成10mL,需把濃縮到一定體積的水樣移至50mL左右的指形管中,經24h以上靜置后再濃縮;—將濃縮后的樣品全部移入已經標記10mL容積的指形管中,靜置24h后,用吸管輕吸多余的清液,使液面凹處恰在標記上;—計數取樣時,水樣務必充分搖勻,用取樣管迅速吸取0.25mL于計數框內,加蓋蓋玻片使不留氣泡。之后的計數方法與直接計數法相同。計數結果記入表A.4中;—網采樣品,可適當濃縮(或稀釋按本法計數。計數過程中應注意以下事項:—計數時一般以種為單位分別計數。優勢種、常見種、赤潮生物種應力求鑒定到種;—凡失去色素或不足一半的殘體,不在計數之列;—膠質團大群體和浮游蘭藻類等不易計數的種類,可用數量等級符號、、表示;—對進入浮游生物中的底棲種類,均按細胞記數,并將它們作為單項列入浮游植物總量中;—填表時,應特別注意不同計數方法的水樣量、沉降量、濃縮量(或稀釋量)、計數面積或計數量,并進行必要的換算。5.3.3浮游動物樣品的處理與分析浮游動物樣品靜置沉淀后進行必要濃縮,按序分別移入已備好內外標簽的標本瓶中,測定其生物量及計數。儀器及設備如下:—布氏漏斗;—抽濾瓶;—吸水紙;—吸管;測定步驟如下:—篩絹標定:將上述篩絹剪成與漏斗內徑等大,浸濕后鋪于漏斗中,用真空泵抽去篩絹上多余水分,稱取篩絹濕重并記錄于表A.5中。該標定后的篩絹可反復使用;—樣品測定:把標定過的篩絹鋪于漏斗中,開動真空泵,倒入已剔除雜質的欲測樣品;待水分濾干后關閉真空泵;小心取出帶樣品的篩絹放在吸水紙上,吸去多余水分;將樣品(連同篩絹)置于扭力天平稱重,并將結果填于表A.6中的相應欄目中。9儀器及設備如下:—浮游生物體積測量器;—抽濾瓶;—吸管;—鑷子。測定操作過程如下:—測量器體積標定:將一定體積的水(如50.0mL)注入測量器中,排除底蓋與篩絹之間的氣泡;旋轉測量器頂端指針使針尖恰好接觸液面,用固定螺絲固定好指針位置。打開底蓋,倒出注入的水。—樣品測定:將經除去雜質的樣品倒入打開底蓋的體積測量器中,用真空泵抽去樣品中的水分;然后扭緊底蓋,用滴定管(裝有50.0mL5%甲醛海水固定液)從測量器加水孔注入該固定液,排除底蓋與篩絹之間的氣泡(用小吸管吸取)使液面恰好與指針針尖接觸為止。此時滴定管中剩余的固定液量即為被測樣品的體積。測定結果記錄于表A.5中。淺水Ⅰ、Ⅱ型浮游生物網采集的樣品分別用于大型和中、小型浮游動物(包括夜光藻)的種類鑒定和計數。儀器及設備如下:—體視顯微鏡;—普通顯微鏡;—計數器;—鑷子;—解剖針;—計數框:取直徑為8cm左右的培養皿,于其內粘上若干玻璃條即可。玻璃條間距根據體視顯微鏡視野而定;0.7cm橡皮塞,做成直徑與管子內徑相等的隔板;分別于兩隔板的圓心和兩側打二個小孔,于圓心處套入一根內徑2.5mm的玻璃管;將隔板裝入上述管子中,使下隔板與管子下端的體積恰為10mL或5mL;另取一細銅棒(直徑約2mm)做提柄,于下端連接一塊略大于管子直徑的圓銅板,板上粘上與銅板等大的橡皮墊;將此提柄插入管內,即構成取樣管。取樣時,將取樣管插入已知體積的標本容器中,通過提柄的上下運動使樣品混勻,然后迅速使橡皮墊封閉管子的下端再移出取樣管,將取出的樣品全部置于浮游動物計數框即可。按以下步驟操作:—標本數量較少的應全部計數;—若數量較大,應先將個體大的標本(如水母、蝦類、箭蟲等)全部揀出分別計數;—其余樣品稀釋成適當體積,再用浮游動物取樣管取樣計數;—計數結果記入表A.6和表A.7中。計數時應注意以下事項:—計數時一般以種為單位分別計數;優勢種、常見種應力求鑒定到種;—生物量測定時,遇有含水量多的、較大型的浮游動物(如:水母、海樽等應在所填表格相應的備注欄里注明,以備查用;—所有浮游動物的殘損個體,按有頭部的計數;—填表或計算時,應注意樣品體積、取樣計數量、樣品稀釋倍數及濾水量等的換算。經鑒定、計數后的所有樣品,需收集裝回原標本瓶中妥善保存,以備復查或進一步深入研究。長期保存樣品的標本瓶密封性能應好,必要時可封臘保存。樣品的內外標簽應完整。定液。定期檢查保存的樣品,以防固定液干涸或標本霉變。5.4.1浮游植物細胞數的統計5.4.1.1沉降計數法和直接計數法的統計按式(1)計算:式中:N—每升水樣的藻類細胞數,單位為個每升(個/L);n—三個分樣的總細胞數或其平均值,單位為個;V—三個分樣的總體積或其平均值,單位為毫升(mL)。5.4.1.2濃縮計數法的統計按式(2)計算:式中:N—每升水樣的藻類細胞數,單位為個每升(個/L);n—取樣計數所得的細胞數,單位為個;V′—水樣濃縮的體積,單位為毫升(mL);V—采水量,單位為升(L);V″—取樣計數的體積,單位為毫升(mL)。5.4.2浮游動物生物量和個數的統計根據流量計的轉數(r)按式(3)計算濾水量:式中:V—濾水量,單位為立方米(m3);n—實際采樣時流量計的轉數,單位為轉(r);V0—流量計的標定值,單位為立方米每轉(m3/r);S—浮游生物網網口面積,單位為平方米(m2);D—流量計標定時的平均拖曳距離,單位為米(m);n0—流量計標定時的平均轉數,單位為轉(r)。5.4.2.2根據繩長計算濾水量:若無流量計,按式(4)計算濾水量:式中:V—濾水量,單位為立方米(m3);S—浮游生物網網口面積,單位為平方米(m2);L—采樣時放出的繩長,單位為米(m)。5.4.2.3濕重生物量和體積生物量計算濕重生物量以mg/m3表示,體積生物量以mL/m3表示,按式(5)計算:式中:B—濕重生物量,單位為毫克每立方米(mg/m3)或體積生物量,單位為毫升每立方米(mL/m3);S—樣品濕重,單位為毫克(mg)或樣品體積,單位為毫升(mL);V—濾水量,單位為立方米(m3)。浮游動物個體數以個/m3表示,按式(6)計算:式中:N—每立方米水體中的個體數,單位為個每立方米(個/m3);n—取樣計數所得的個體數,單位為個;a—取樣體積與樣品總體數之比;V—濾水量,單位為立方米(m3)。將上述各種統計數據分別填入表A.3~表A.7。按分類系統,將上述各表數據分別匯總于表A.8和表A.9中。根據表A.8和表A.9統計數據,按以下標準繪制浮游生物平面分布圖:5×103個/L4個/L、5×104個/L、1×105個/L5×106個/L個/L和大于107個/L。b)主要種(包括夜光藻或其他赤潮生物小于102個/L、1×102個/L、5×102個/L、1×103個/L、5×103個/L、1×104個/L、5×104個/L、1×101×107個/L和大于107個/L。根據表A.8和表A.9統計數據,按以下標準繪制浮游生物平面分布圖:3333。3個/m3。圖表繪制應注意以下事項:—參與資料整理,校對人員,均應在圖表上簽名;—所有化學調查項目的分析方法和資料整理,均按GB17378.1~GB17378.6的規定進行;—報告編寫完畢,應及時把所有資料整理報出、歸檔。6大型底棲生物生態調查6.1調查內容和方法生物調查內容如下:—鑒定生物種類,測定棲息密度和生物量,分析其相對豐度和群落多樣性;—確定群落中的主要種,并盡可能測量其個體大小,年齡結構、性別比例等。有條件的可做干濕—主要種類體內污染物質測定。環境調查內容如下:—環境特點調查,包括海區的地理環境、形態和沉積物、狀況、污染源的位置等;—污染物的測定項目應根據污染源的性質選定,分析方法按GB17378.4和GB17378.5的規定執行。調查之前,應對調查水域的基本狀況有所了解,包括陸上和海上污染源的位置分布、海區的沉積物類型、海流、泥沙運動和底棲生物的基本特點等。并應進行必要的社會調查,特別應注意沿海工業和海上工程建設對海區環境的影響,為制定調查方案提供依據。站位的布設應根據污染源的位置和分布,結合海區的水文、水質、沉積物等環境資料綜合考慮。特別應注意水深、沉積類型和底棲動物區系異同。調查站位與沉積物污染調查一致。同時還應選擇生態類型相同的非污染點或斷面作為參照,以便進行資料對比和評價。城市工業排污、海上石油平臺及海上傾廢區等點源污染的調查,應按點源污染的濃度梯度布設直線型或輻射型的站位,站位多少可根據實際需要酌定。一般在封閉和半封閉的海灣、河口或在復雜沉積類型的水域應密些,在淺海或沉積類型均勻的水域可適當疏些。作為一般性的污染普查,應按方格式布設站位,斷面的布設主要考慮水深和鹽度梯度的變化。12月~2月)一年調查4次或根據需要適當增減調查次數。6.1.2.3.2監測性調查:根據各地實情和需要,選擇若干固定月分和若干站點定期取樣分析。所選時間和站位應與基線調查時的時間和站位相應。6.1.2.3.3應急調查:若遇突發污染事故,傾廢、赤潮等,應跟蹤監測,并于事故后進行若干次危害評價調查。2采泥器,每次取3次;在港灣中或無動力設備的小船上,可用速間歇開車進行拖網。每站拖網時間一般為15min;半定量取樣,拖網時間10min(以網具著底始算起至起網止)。深水拖網,可適當延長時間。以下為常用的采泥器類型:a)抓斗式采泥器:由兩個可活動的顎瓣構成,兩瓣的張口面積為0.1m2。兩顎瓣頂部由一條鐵鏈連接,當鐵鏈被掛到鋼絲繩末端的掛鉤上時,兩顎瓣呈開放狀態。采泥器一經觸及海底,掛鉤錘即下垂與鐵鏈脫鉤。當采泥器上提時,通過掛鉤對橫梁的拉力,連接兩顎瓣的鋼絲繩拉緊,使兩顎瓣閉合,將沉積物取入。深水(500m以上)采泥,應換上帶重錘的掛鉤,并在兩顎瓣的外面附加配重,以增加采泥器的重量。2。操作時,把采泥器放在木制框架(規格65cm×55cm×30cm)上,將負載板插入導管中,在負載板的下孔中插入一鐵銷,上孔中插入一長鐵桿,另在鐵桿下方基架臺上放一塊三角力。這時再把左右顎瓣臂向上推,使之與釋放桿上的制動栓卡在一起,兩顎瓣即成開放狀態。當采泥器平穩地降至海底時,由兩個啟動板的觸底帶動釋放桿將導管周圍的環托起,掛鉤即脫落,在彈簧的作用于下顎瓣插入底質內。此時,制動栓也互相脫離。當鋼絲繩上提時,兩瓣閉合將沉積物取入。在風浪較大和遇到砂底的情況下,均宜使用彈簧采泥器,并加配重。c)“大洋-50”型采泥器:結構基本與抓斗式采泥器相同,取樣面積為0.05m2。適于無動力設備的小船在內灣取樣。以下為幾種常用的拖網類型:a)阿拖網:網架用鋼板或鋼管制成,網口呈長方形,兩邊皆可在著底時進行工作。口緣的網架上。為使柔軟的小動物免受損壞,可在網內近尾部附加一個大網目的套網以使之與大動物隔開。該網網口寬度可根據調查船噸位及調查海區酌定。一般調查船上用1.5m寬的即可。船上起重設備差,或在內灣調查,也可用0.7m~1m寬的小型網。深水調查,一般多用寬度為3m的大型網,其網架也要相應加重。拖網時,應用兩根粗繩分別扣結在網架兩側邊上,并將其另一端繞結在網袋末端,避免網內泥砂多時網衣破裂。b)三角形拖網:網架為鋼質材料,呈三角形,架的四周橫接三根圓鋼,起加固作用。網口寬度,大小及網衣結構與阿拖網相同。三角形拖網適于沿岸淺水和底質較復雜的海區。c)雙刃拖網:網架長方形,以刀刃形鐵板作網口的上下緣,連接網口的網叉分為兩段,其中有一段用線繩或麻繩連接,以防網口卡于底上巖石,荷重過大時,導致網具丟失或發生危險。網口寬度有60cm和80cm兩種,網袋的長度為寬度的2倍。該網具適于硬底、碎石或砂礫沉積物區域工作。篩)、排渣閥、支架等組成。筒體直徑50cm,高75cm(其中漏斗狀部分25cm)發生器安于漏斗部底側,由一切成鍥形的水管焊貼于近筒邊(距離1cm左右當進入的水流經此處,即受筒邊阻擋而改變方向,并形成漩渦;分流器系控制水流強弱的裝置,具雙向流水控制閥門;生物收集器為一復合套篩和木架組成,套篩分三層,上層網目為2mm,中層為1mm,底層0.5mm,用時與漩渦分選裝置配套使用;分選樣品時,排渣閥封閉筒底洞口,樣品分選完畢,排渣閥開啟,將余渣排出。及繩索計數器,最好能配張力表、電子秤,以便從鋼絲繩的張力及時了解網具是否到達海底和拖網狀況,確保安全。吊桿一般裝在主甲板后部,高出船舷5m左右,舷間距約1m,可作回轉運動。用于采泥器取樣的絞車及吊桿應能負荷500kg,使用彈簧采樣器的負荷應為2000kg。吊桿高出船舷的程度盡量減小,以能使用為度。6.2.2.2鋼絲繩:拖網應用直徑8mm~10mm的軟質鋼絲繩。其長度按調查海區的水深確定,備有足夠用量。在專供采泥用的絞車上,一般用直徑4mm~6mm的軟質鋼絲繩。在鋼絲繩與網具或采泥器相連接處應裝有轉環,以防操作過程鋼絲繩扭曲或打結。拖網時,應附加保險繩,以便網具在海底碰到障礙物時,保險繩斷開,不致丟失網具。6.2.2.3沖水設備:船上應裝有水龍頭及橡膠水管,供采泥和拖網后沖洗沉積物樣品和工具。無供水設備時,應另備小型抽水泵。6.2.3樣品采集和處理抓斗式采泥器按以下方法操作:a)投放:將采泥器活門上的鐵鏈掛在掛鉤上,慢慢開動絞車,提升采泥器。隨著鋼絲繩拉緊,兩顎瓣自動張開。采泥器上升到略超過船舷時,即轉動吊桿將其送出舷外,待穩定后慢速下降,入水后再快速下降。放出的鋼絲繩可稍長于水深。在淺海采樣時,當放出的鋼絲繩松弛時,即采泥器已著底,應立即停車。在深水采樣時,可根據鋼絲繩傾角的大小,加適當的余量。b)提升:開始用慢速,離底后改用快中速,接近水面時,再用慢速。當采泥器超過船舷時,應立即停車,轉動吊桿使之移近船舷或用鐵鉤將其鉤入舷內,再慢慢下降,將采泥器放在一預先準備好的白鐵盤中。先打開采泥器兩顎瓣上方的活門,從活門處觀察沉積物的顏色、厚度和生物棲息情況等,并作好記錄。然后將活門上的鐵鏈重新掛于掛鉤上,慢慢開動絞車,使采泥器上升離開鐵盤,顎瓣即自動打開,使泥樣落盤中。彈簧采泥器按以下方法操作:a)投放:首先,在掛鉤鉤住眼環使顎瓣張開后,取下負載板,用卡環連接采泥器上的鋼絲繩與絞車上的鋼絲繩,然后慢慢開動絞車將提升起來的采泥器送出舷外,并投放。采泥器接近海底時改用慢速下降。b)提升:操作方法基本與抓斗式采泥器相同,只是在采泥器提升上來后,須停放在一個預先準備好的框架上,再打開兩個顎瓣,使泥樣落在框架下面的白鐵盤中將采到的沉積物樣品移入漩渦分選器筒體中,打開分流器的閥門進水,利用水流通過漩渦發生器攪動樣品,浮選出比重輕的生物,比重大的生物連同余渣沉底。分流器的進水不宜太大,以免較大顆粒的沉積物攪起溢出筒體上方出水口。從出水口溢出的水體和生物流到套篩,將截留在篩網內的動物按體形大小及軟硬程度分別揀入盛有海水的器皿中,然后按類別或軟硬分別裝瓶,并注意勿使小動物遺漏。應仔細揀出余渣中比重較大的動物。難挑揀的生物連同余渣帶回實驗室,在解剖鏡下挑揀。采泥標本一律用5%甲醛溶液固定保存。6.2.3.2.1網具的選擇:根據調查海區各站深度與沉積物狀況選擇適宜網具。較硬的沉積物用阿拖網或三角形拖網;巖石或礫石較多以及海藻叢生的區域,使用雙刃拖網。深海作業,一般使用大型阿拖網,在港灣中可使用小型拖網(網口寬0.7m~1m)。6.2.3.2.2投網:拖網應在每一測站各調查項目完成后進行。調查船以低速離站開航,航向穩定后投網。開動絞車將網具吊于舷外,理順網衣和網架,然后慢速下降。放出繩長一般為水深的三倍左右,近岸淺海可更長些。在100m水深工作時,因鋼絲繩重量大,繩長不宜超過水深的2倍。拖網的航速控制在2kn左右,船速大于4kn時,可采取間歇開車,利用船體的滑行速度拖網。拖網過程中,應有專人監視網具工作情況,并根據鋼絲繩的傾角和弛張程度或張力表來判斷網具是否著底并正常運行。遇有異常,應立即停車、放繩或起網。拖網時間是從放繩完畢,網著底始至起網止。6.2.3.2.3起網:應先降低船速,然后起網。當網升至近水面時,應以慢速使網具離開水面,網尾部接近船舷時停車。轉動吊桿方向(吊桿不能轉動時用鐵鉤等將網具拉入舷內慢慢將網放下,使網袋后部落在備好的鐵盤內。解開網袋,將捕獲物傾入盤中。網袋內如有泥砂,則移入2mm套篩沖洗,并將掛夾在網目上的生物挑揀干凈。部分稱重,并計算各類群或各種類個體,換算成標本總數量。保留一定數量個體數(大、中、小個體作為生物學等測定,余者經稱重后處理掉。稱重和計數結果記入表A.10中。發現具典型生態意義的標本,應及時拍照并進行有關生物學的觀察及測量。需培養和麻醉的生物,用海水沖洗干凈,并盡量減少刺激、損傷。標本按類群分離完畢,按個體大小分裝于不同規格的標本瓶或鐵皮箱。放入鐵皮箱中的標本,用紗布包好附上竹簽。裝入容器的標本量不得超過體積的2/3。6.2.3.3.2固定和保存:標本在野外固定時,除海綿動物用85%酒精外,其余各類均可先用5%甲醛溶液(加適量硼砂或六胺)。較大魚類應用針筒將固定液注入體腔,海膽等大型棘皮動物,應在其圍口膜處刺一小孔,使固定液滲入。標本帶回實驗室應及時分離,并按需要更換固定液。一般而言,藻類、海草、魚類仍用5%甲醛溶液固定保存,其余各類改換70%酒精(加入5%甘油)固定6.2.3.4污染物測定的生物樣品6.2.3.5.1填寫采樣記錄表:每站取樣時,按表A.10的各項填寫。表中采泥和拖網標本數是指每站所取得的各類群生物的裝瓶數和包數。記事欄記錄該站工作的情況。6.2.3.5.2標簽:每號標本瓶中須放標簽(見表5和表6式樣)。標簽在填寫采樣記錄表時一并寫好。放在鐵皮箱中的大個體生物,應另加一個竹簽。竹簽上應有站號、標本編號和日期等。標簽、記錄表和標本三者應相符,切勿混淆。標本編號應遵循以下規定:a)采泥標本編號:MjAK。M—調查船代號;j—取樣站位序號(j=1,2,3……);A—采泥標本符號;K—采泥標本序號(K=1,2,3……)。b)拖網標本編號:MjBi。M—調查船代號;j—取樣站位序號(j=1,2,3……);B—拖網標本;i—拖網標本序號(i表5采泥標簽標本號深度m底質采泥器m2日期年月日種名表6拖網標簽站號海區標本號深度m種名6.2.4標本歸類和采集工具保養6.2.4.1標本歸類:標本處理、分離、投放標簽及固定完畢后,按各大類群分別裝箱。海上難分離的樣品應帶回實驗室處理。6.2.4.2工具保養:每航次工作結束后,對所用工具進行清理和保養。網具、采泥器、漩渦分選器及其6.3室內標本處理檢查全部標本編號、數量等與海上記錄表的內容是否相符,遇有不符,應及時查找。無論按標本編號或站號順序鑒定標本,對主要種應盡可能鑒定到種,并按表A.12各項生物學數據計算、測定和填寫。鑒定的種類按順序在采泥或拖網標本序號(k或i)后另起一個新序號(如k-1,k-2…),有多少種類就編多少號,同時將種名寫在新標簽上。將標本放于吸水紙上吸去表面水分,去除底棲動物的管子、寄居蟹的寄居外殼、體表偽裝物和其他附著物,用感量0.01g扭力天平稱取濕重。若要稱量干重,應將標本用淡水或蒸餾水沖洗,吸去表面水分,置70℃~100℃烘箱中至恒重(用感量0.0001g的天平稱量)。必要時,可分殼肉稱量和稱取灰份重。稱重結果記入表A.11中。群體生物(如:苔蘚苔、珊瑚等)和定性標本不稱重。對易斷的紐蟲,環節動物只計頭部。軟體動物死殼不計數。標本量大時,可取部分稱重計數換算,主要種體長、體寬和體高的測量,按各類群規定的測量法進行。對典型意義的指示種,有條件時可用電鏡掃描測量生長線、計算生長率。6.4資料整理與保存數據計算按以下方法計算:a)生物密度和生物量的換算:將所有站位的實測生物個體數和生物量數據按其采樣面積換算成個/m2和g/m2,分別表示生物密度和生物量;b)生物密度和生物量統計:將各站位各類群生物密度記入表A.14中,并對各欄數據進行累加,求得整個海區的平均值。將各站位各類群生物量記入表A.15中,并對各欄數據進行累加,求得整個海區的平均值;c)各生物類群的組成百分比:根據表A.14和表A.15匯總的數據,計算各類群的生物密度和生物量在各站位和整個海區的組成百分比。數據按以下方法進行表示:)分別填入海圖上的相應站位,然后以內插法繪出等值線圖,或用不同大小的圓圈表示不同量級的密度分布。b)生物量分布圖將表A.15中的數據(按總生物量或各類群)分別填在海圖上相應的站位,用內插c)各類群生物密度和生物量組成百分比圖:按各類群生物所占密度或生物量百分數比例繪制成圓形圖,不同類群可以不同線條或圖案裝飾,使之更直觀。也可用直方圖或其他表示法。d)種類分布圖:取主要種的有關數據繪制分布圖。這些種類可分別以不同符號表示,每張圖可畫一至數個種。e)根據表A.12和表A.13的數據,按種歸類整理并填寫附表A.16和表A.17。除按傳統的資料歸檔方法保存資料外,電子文檔輸入計算機,用磁盤貯存。7潮間帶生物生態調查7.1調查內容和方法生物調查內容如下:—不同生境動、植物的種類、數量(棲息密度、生物量或現存量)及其水平和垂直分布的調查;—污染生態效應調查,例如:污染指示生物的出現或消失;主要種類的增減、異常、死亡;種群動態;豐度、多樣性、生長率、生殖力的改變;各生物類群比例關系的變化以及群落結構的演替等;—主要種類體內污染物質的測定。環境調查內容如下:—環境基本特征:包括港灣形態、潮夕類型、灘涂闊狹、沉積物類型、污染源分布及位置等;—化學要素:鹽度、溶解氧(DO)、化學需氧量(COD)、pH值等,并依調查區污染源性質和調查目—沉積物要素:粒度、有機質、硫化物、氧化還原電位等,并依調查區污染性質和調查目的,選測其他有關項目。調查地點的選擇應遵循以下原則:程建設b)根據調查目的,結合污染源分布狀況,考慮污染可能影響的范圍;c)調查區內可能有巖岸、沙灘、泥沙灘、泥灘等多種海岸類型,選點應包括有不同類型,若有困難,為保證資料的可比性,所選點的沉積物類型應力求一致;d)應在遠離污染源的地方,選一生態特征大體相似的清潔區(非污染區)作為對照點。a)半日潮類型按以下方法劃分:—高潮區(帶最高高潮線至小潮高潮線之間的地帶;—中潮區(帶小潮高潮線至小潮低潮線之間的地帶;—低潮區(帶小潮低潮線至最低低潮線之間的地帶。b)日潮類型按以下方法劃分:—高潮區(帶回歸潮高潮線至分點潮高潮線之間的地帶;—中潮區(帶分點潮高潮線至分點潮低潮線之間的地帶;—低潮區(帶分點潮低潮線至回歸潮低潮線之間的地帶。c)混合潮類型按以下方法劃分:—高潮區(帶高高潮線至低高潮線之間的地帶;—中潮區(帶低高潮線至高低潮線之間的地帶;—低潮區(帶高低潮線至低低潮線之間的地帶。根據生物群落在潮間帶的垂直分布來劃分,由于生物群落可隨緯度高低、沉積物類型、外海內灣、鹽度梯度、向浪背浪、背陰向陽等復雜環境因素的不同而改變,因此,要提供一個統一模式是困難的。一般而言,巖石岸大體分為:濱螺帶;藤壺-牡蠣帶;藻類帶。泥沙灘可有:綠螂-沙蠶-招潮蟹灘(或南方的鹽堿植物帶蟹類-螺類灘;蛤類灘。各地在調查時可根據各區、層的群落優勢種給于更確切的命名。斷面布設應遵循以下原則:a)調查地點選定后,對該地生境要有宏觀概念,選取不被或少被人為破壞、具代表性的地段布設調查斷面;b)每一調查地點,通常要設主、輔兩條斷面,若生境無大差異,可只設一條主斷面;c)斷面位置應有陸上標志,走向應與海岸垂直。取樣站布設應遵循以下原則:b)巖石岸布站應密切結合生物帶的垂直分布;軟相灘涂除考慮生物的垂直分布外,應特別注意潮區(帶)的交替、沉積物類型的變化和鑲嵌;c)各站間距離視巖岸坡度、灘涂闊狹酌定。確定站位后,應設有固定標志,以便今后調查找到原位。為防標志物遺失,需按站序測量、記錄各站間距離;d)巖沼和灘涂水洼地是一種特殊生境,在污染調查中具有重要意義,應另布站取樣。調查時間的確定應遵循以下原則:a)潮間帶采樣受潮汐限制,為獲得低潮區(帶)樣品,須在大潮期間進行。若斷面或站數較多而工作量較大時,可安排大潮期間調查各斷面的低潮區(帶小潮期間再進行高、中潮區(帶)的調查;12月~2月一年最少調查4次;c)監測性調查,可根據各地實情選擇若干月份定期進行(如枯水期、豐水期等)。但為了資料比較,所選月份應與基礎調查月份一致,并應注意避開當地主要生物種類的繁殖期;d)急調查(偶發污染事故、赤潮等應進行跟蹤觀測,并對事故后所造成的影響作若干次必要的調查。主要采樣工具和設備如下:—采樣器:泥、沙等軟相沉積物的生物取樣,用灘涂定量采樣器。其結構包括框架和擋板兩部分,均用1.5mm~2.0mm厚的不銹鋼板彎制而成。規格25cm×25cm×30cm。配套工具是平頭鐵锨;—定量框:巖岸生物取樣用25cm×25cm定量框。若在高生物量區取樣,可用10cm×10cm定量框。計算覆蓋面積,則用相應的計數框。其框架可用鍍鋅鐵皮或3mm厚的塑料板制成。配套工具有小鐵鏟(或木工鑿子)、刮刀和撈網;—漩渦分選裝置:用于潮間帶灘涂調查的生物樣品淘洗時,應配備有3kW~5kW的簡易汽油抽水泵作動力;—過篩器;—其他外業調查常用設備。定量取樣按以下方法進行:a)灘涂取樣用定量采樣品,樣方數每站通常取8個(合計0.5m2)。若灘面沉積物、類型較一致、10m有一標志)于站位兩側水平拉直,各樣方位置要求嚴格取在標志繩索所標位置,無論該位置上生物多寡,均不要移位。取樣時,先將取樣器擋板插入框架凹槽,用臂力或腳力將其插入灘涂內;繼而觀察記錄框內表面可見的生物及數量;然后,用鐵锨清除擋板外側的泥沙再拔去擋板,以便鏟取框內樣品。鏟取樣品時,若發現底層仍有生物存在,應將取樣器再往下壓,直至采不到生物為止。若需分層取樣,可視沉積物分層情況確定;b)巖石岸取樣一般用25cm×25cm的定量框,每站取2個樣方。若生物棲息密度很高,且分布較均勻,可采用10cm×10cm的定量框。確定樣方位置應在宏觀觀察基礎上選取能代表該水平高記錄優勢種的覆蓋面積。然后再用小鐵鏟、鑿子或刮刀將框內所有生物刮取干凈;c)對某些棲息密度很低的底棲生物(如:海星、海膽、海仙人掌等)或營穴居、跑動快的種類(沙蟹、2的大面積計數(個數或洞穴數并采集其中的部分個體,求平均個體重,再換算成單位面積(m2)的數和量。每站定量取樣的同時,應盡可能將該站附近出現的動植物種類收集齊全,以作分析時參考,但定性樣品務必與定量樣品分裝,切勿混淆。7.2.2.3供分析體內污染物質的生物樣品的采集采集供分析生物體內污染物質累積情況的生物種類,應按以下基本原則選擇:—固定生活在一定區域、個體大小和數量適于分析測定的經濟種和優勢種;—力求在各斷面、全年均能采到的種類;—對污染物質有較強忍受能力和較高富集能力的種類;—為保護水產養殖業和人體健康,對附近養殖品種也采樣分析。7.2.3水質和沉積物樣品采集應在各斷面調查的同時,于高平潮和低停潮時各采一次水樣。河口區可考慮在兩次采水期間內增加一次。巖沼和灘涂水洼內積水應另行采樣。必要時,酌情對生物定量取樣站穴內積水或沉積物間隙水采樣分析。應與生物定量取樣同步進行,取樣站數依灘涂沉積物變化酌情而定。遇表、底層沉積類型有明顯差異時,最好應分層取樣,并記錄其層、色、嗅味。其樣品編號必須與該站生物定量樣品編號一致。執行。7.2.4生物樣品的淘洗與預處理本法應在小船上,隨著潮水上漲或退落進行操作。若無船只而考慮直接在灘涂上進行淘洗,分選裝置和抽水泵應附設防沉底板,并應慮水源的充分供給。分選操作步驟如下:—將該裝置牢靠固定在小船(或灘涂)上,用消防水管連結裝置和抽水泵;—啟動抽水泵,待裝置的筒體內注有約1/2海水時,調節分流器水壓使渦流適中,并及時倒入待淘洗樣品;—約經10min渦動,大多數體輕、柔軟的生物則可以從出水口分選流出,截留于套篩(收集器)上。此時,可先取出套篩并換上另一套篩,同時調節分流器加大水壓,經3min~5min,一些個體較重的生物也可分選出來;—當進出筒體的水色一致時,即可打開裝置的分流閥,關閉進水閥,并取一網篩或搪瓷盤置于筒體下,打開排渣閥排出余渣;—仔細將各套篩截留的和余渣中存留的生物挑揀干凈;—按上述步驟分選其他樣品。本法需用人力操作,費力費時,但當不具備用漩渦分選裝置時,仍是可靠方法。為了方便淘洗和減少樣品搬運,斷面應力求布設于近水源處。按以下方法進行生物樣品的預處理:a)采得的所有定量和定性標本,應洗凈,按種分開裝瓶(或用封口塑料袋裝)。若容器不足,應按食性及個體軟硬分裝,以防標本損壞;b)灘涂定量調查,若因時間關系,不能將余渣中的標本揀取干凈,應只揀出特殊標本后把余渣另行裝瓶(袋回實驗室在雙筒解剖鏡下仔細挑揀;c)謹防不同站或同一站的定量和定性標本混雜,應按站在定量或定性標本裝瓶(袋)后,立即用鉛d)按序加入5%中性甲醛固定液(見6.2.3.3.2)。余渣固定時可依固定液水樣量,按1000mL加入1g虎紅(C20H6Cl2I4O5)的量染色,便于室內標本挑揀;e)為方便標本鑒定,對一些受刺激易引起收縮或自切的種類(如:腔腸動物、紐形動物宜先用水合氯醛或烏來糖少許進行麻醉后再行固定;某此多毛類(如沙蠶科、吻沙蠶科可先用淡水麻醉,然后用鑷子輕夾頭部使吻伸出,再加固定液;藻類標本除用5%中性甲醛溶液固定外,最好海藻志》附錄;能帶回一些完整的新鮮藻體,制作臘葉標本,以保持原色和長久保存海藻志》附錄;f)供分析測定體內污染物質的生物樣品,切勿用甲醛溶液固定。而應洗凈冰凍保鮮。每份樣品用紗布或封口塑料袋包裝,放入寫明采集地點、時間、斷面、潮區(帶)的竹制或塑料標簽。送回實驗室及時測定。外業記錄要有專人負責,認真填寫表A.18;繪制站位分布圖;記錄環境基本特征、生物分布、生物異常等現象;填寫標簽。外業記錄應用鉛筆填記,字跡須清晰,禁止涂改,記后應妥善保管,嚴防受潮或丟失。表7定量標簽項目編號地點 斷面潮區站號 樣方號標本號 沉積物取樣面積m2種名表8定性標簽項目編號地點 斷面潮區站號 標本號沉積物

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