專科-血液常用檢查二-2

1、血液常用檢查二第一頁，共一百二十五頁。主要內容白細胞計數白細胞分類計數白細胞形態學檢查血小板計數血小板形態檢查第二頁，共一百二十五頁。白細胞計數(white blood cell count，WBC)： 指測定單位容積的外周血各種白細胞的總數。檢測原理 顯微鏡計數法 用白細胞計數稀釋液(稀乙酸)，將血液稀釋一定倍數并破壞成熟紅細胞和固定白細胞 充入改進牛鮑(Neubauer)計數板， 在顯微鏡下計數一定范圍內的白細胞數 經換算求得每升血液中各種白細胞的總數。一、白細胞計數第三頁，共一百二十五頁。第四頁，共一百二十五頁。第五頁，共一百二十五頁。【質量保證】1計數誤差 (1)技術誤差：標準、熟練的

2、操作，儀器的校正、 試劑的標準化和操作人責任心。 1)器材：清潔、枯燥，校準，合格試劑。 2)標本要求：血液分析儀檢測的標本要求及質量保證見表225。第六頁，共一百二十五頁。第七頁，共一百二十五頁。3)加蓋玻片影響：WHO推薦采用“推式法，此法較“蓋式法更能保證充液體積的高度為0.10mm。 4)充池影響： 充池前充分混勻白細胞懸液，防止氣泡。 充池應防止充液過多、過少、斷續，防止氣泡及充液后移動蓋玻片。 技術誤差第八頁，共一百二十五頁。5)計數原那么：計數壓線細胞時， 數上不數下, 數左不數右。 6)計數室內細胞分布要均勻：白細胞總數在正常范圍內時，各大方格間的細胞數不得相差8個以上。2次重

3、復計數誤差不超過l0。7)有核紅細胞影響：外周血出現有核紅細胞，可使白細胞計數結果偏高，須校正。技術誤差第九頁，共一百二十五頁。(2)固有誤差：主要是指計數域誤差(field error)。 是由于每次充池后血細胞在計數室內分布不同 計數域誤差變異系數(CV)可隨計數的細胞數量增多而減小。 白細胞數量太少時(15X109L) 稀釋 固有誤差還應包括計數室和吸管的使用次數，即計數池誤差(chambererror)和吸管誤差 計數誤差第十頁，共一百二十五頁。3)生理狀態影響： 運動、勞動、冷熱水浴、酷熱、嚴寒等常出現一過性白細胞增高；一日之內白細胞數最高值與最低值可相差1倍。另外，吸煙者白細胞總數

4、平均較非吸煙者高30。最好在固定檢查時間。計數誤差第十一頁，共一百二十五頁。 2質量考核與評價 (1)經驗控制 (1)與紅細胞數相比照較：正常范圍下，紅細胞數白細胞數約為500：1。 (2)判斷白細胞計數與顯微鏡白細胞分布密度一致性(表24)：由于手工制備血涂片難以標準化，因此也只能粗略估計，有矛盾者再復查。第十二頁，共一百二十五頁。表24 血涂片上WBC密度與WBC數量關系 血涂片上WBC數：HP WBC(109L) 24 4 7 4 6 79 6 10 10 12 10 12 13 18第十三頁，共一百二十五頁。(2). 兩差比值評價法(3). 雙份計數標準差評價法 2質量考核與評價第十四

5、頁，共一百二十五頁。成人： (410) 109L 新生兒： (15 20) 109L 6月2歲： ( 11 12) 109L參考值第十五頁，共一百二十五頁。10109L稱白細胞增多(1eukocytosis)，4109L稱白細胞減低(1eukopenia)。白細胞數在生理或病理情況下均可有變異。 由于中性粒細胞占白細胞總數的5070，其增高和減低直接影響白細胞總數的變化，中性粒細胞增減的意義與白細胞總數的增減的意義根本上是一致的。 有時兩者的數量關系也有不一致的情況，要具體情況具體分析。臨床意義第十六頁，共一百二十五頁。 白細胞分類計數(differential count，DC)是將血液制成

6、涂片，經染色后在油鏡下觀察白細胞的形態并進行分類，求得各種類型白細胞的比值(百分率) 。分析白細胞分類變化意義時，必須計算各類型白細胞的絕對值(各類型白細胞絕對值白細胞計數值白細胞分類計數百分率)，才有診斷參考價值。 白細胞分類計數的方法有兩種： 一種是傳統顯微鏡分類法， 一種是血液分析儀分類計數法。二、白細胞分類計數第十七頁，共一百二十五頁。 檢測原理 (顯微鏡分類法) 將血液涂成薄膜， 經Wright染色后， 于顯微鏡下，按白細胞形態學特征逐個分別計數，得出各種白細胞百分率。 結合白細胞計數結果，可間接求出每升血液中各種白細胞的絕對值。第十八頁，共一百二十五頁。第十九頁，共一百二十五頁。第

7、二十頁，共一百二十五頁。質量控制分析前質量控制分析中質量控制 血涂片制備 染色 鏡檢部位 鏡檢白細胞數量分析后質量控制第二十一頁，共一百二十五頁。成人白細胞分類參考值 百分率() 絕對值(109L)中性桿狀核粒細胞 1 5 0.04 0.5中性分葉核粒細胞 50 70 2 7嗜酸性粒細胞 0.5 5 0.05 0.5嗜堿性粒細胞 0 1 0 1淋巴細胞 20 40 0.8 4單核細胞 3 8 0.12 0.8參考值第二十二頁，共一百二十五頁。正常情況下，中性桿狀核粒細胞占1一5，中性分葉核粒細胞占50一70， 2葉核細胞為1030， 3葉核為4050， 4葉核為10一20， 5葉核小于3。 正

8、常時，外周血中性粒細胞核以3葉的居多，桿狀核與分葉核之間的正常比值為 l ：13。參考值第二十三頁，共一百二十五頁。1.中性粒細胞增多 白細胞總數與中性粒細胞(neutrophil，N) 白細胞總數與中性粒細胞數量增多及減少的定義見表. 在外周血中，由于中性粒細胞占白細胞總數的50一70，臨床意義根本一致。 淋巴細胞、嗜酸性粒細胞等數量上的改變也會引起白細胞總數的變化。因此，還應具體分析。臨床意義第二十四頁，共一百二十五頁。1)中性粒細胞生理性增多：常不伴有白細胞質量的改變。 年齡：臨床意義第二十五頁，共一百二十五頁。1)生理性增多： 日間變化：一日之間最高值與最低值之間可相差1倍。 運動、疼

9、痛和情緒的影響：如劇烈運動可使短時間內白細胞高達35X109L，以中性粒細胞為主。當運動結束后迅即恢復原有水平。 妊娠與分娩：分娩后2 5d內恢復正常。 其他：吸煙者白細胞的生理波動很大，30%以內波動多無意義，只有通過定時和反復觀察才有意義。第二十六頁，共一百二十五頁。2)病理性增多：外周血白細胞10X109L 反響性增多，可見于： A、 急性感染或炎癥：為引起白細胞總數和中性粒細胞增多最常見的原因。 球菌、桿菌、真菌、放線菌、病毒、 立克次體、螺旋體、寄生蟲等。 增高程度與病原體種類、感染部位和程度以及機體的反響性等有關 第二十七頁，共一百二十五頁。B、類白血病反響：指機體在有明確病因的刺

10、激下，出現白細胞數中度增高(50Xl09L)，多以成熟中性粒細胞增多為主，原始、早幼粒細胞增多少見(10)，常伴較明顯的中性粒細胞中毒性改變，其他細胞均無明顯變化。第二十八頁，共一百二十五頁。C. 廣泛組織損傷或壞死： 嚴重外傷、手術創傷、大面積燒傷、凍傷以及血管栓塞(如心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性壞死等使組織嚴重損傷者，在1236h內常見白細胞增高，以中性分葉核粒細胞增多為主。 有無術后感染，與心絞痛鑒別。 第二十九頁，共一百二十五頁。 D、 急性溶血：缺氧及分解產物刺激 E、 急性失血： 消化道大量出血、內臟破裂如脾破裂或輸卵管妊娠破裂等，白細胞總數常在12h內迅速增高，可達(10 2

11、0)X109L，但此時的紅細胞數和血紅蛋白量仍可暫時保持正常范圍，待組織間液吸收回血液或補充循環血容量后，才出現紅細胞和血紅蛋白減低。早期診斷內出血的參考指標。第三十頁，共一百二十五頁。F、急性中毒：a、外源性中毒：化學物質或藥物如汞、鉛、安眠藥急性中毒，生物毒素如昆蟲毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。b、內源性中毒：如尿毒癥、糖尿病酮癥酸中毒、子癇、內分泌疾病危象等。第三十一頁，共一百二十五頁。G、惡性腫瘤： 非造血系統惡性腫瘤可出現持續性白細胞增高，以中性分葉核粒細胞增多為主。其機制可能為： 腫瘤壞死分解產物刺激 腫瘤細胞(如肝癌、胃癌等) 促粒細胞生成因子。 惡性腫瘤骨髓轉移，破壞骨髓調控

12、作用等H、其他原因： 見于類風濕性關節炎、自身免疫性溶血性貧血、痛風及嚴重缺氧 應用皮質激素、腎上腺素、氯化鋰等。 第三十二頁，共一百二十五頁。 異常增生性增多 A、 白血病：第三十三頁，共一百二十五頁。B、骨髓增殖性疾病： 包括真性紅細胞增多癥、原發性血小板增多癥和骨髓纖維化癥(也可包括慢性粒細胞白血病)等。 本組疾病均系多能干細胞的病變引起，具有潛在演變為急性白血病的趨勢。 其特點為除了一種血細胞成分的主要增多外，常伴有其他一種或兩種血細胞的增生，故常有中性粒細胞增多，白細胞數常在(1030)X109L。 第三十四頁，共一百二十五頁。 (2)中性粒細胞減低(neutropenia)： 白細

13、胞減低主要是中性粒細胞減低。粒細胞減低癥(granulocytopenia)： 中性粒細胞絕對值成人 2.0X109L, 兒童1.5X109L粒細胞缺乏癥(agranulocytosis) ： 外周血白細胞2.0X109L, 中性粒細胞絕對值0.05109L)的一種征象第三十八頁，共一百二十五頁。 第三十九頁，共一百二十五頁。(2)嗜堿性粒細胞減少(basopenia)： 多無臨床意義。減少可見于過敏性休克、促腎上腺皮質激素或糖皮質激素應用過量以及應激反響等。 第四十頁，共一百二十五頁。3淋巴細胞(lymphocyte，L) (1)淋巴細胞增多(lymphocytosis)：指外周血淋巴細胞絕

14、對值增高成人 4.0109L；兒童：4歲以上7.2109L、 4歲以下9.0109L。 第四十一頁，共一百二十五頁。(1)淋巴細胞增多：第四十二頁，共一百二十五頁。(2)淋巴細胞減少(1ymphopenia)： 指外周血淋巴細胞絕對值減低(成人5%),表示感染程度較輕,機體抵抗力較強。 中度左移：白細胞總數及中性粒細胞百分數均增高，桿狀核粒細胞10%并伴有少數晚幼粒細胞及中毒性改變,表示有嚴重感染。重度左移：白細胞總數及中性粒細胞百分數明顯增高，桿狀核粒細胞25%并出現更幼稚的粒細胞，常見于粒細胞白血病或中性粒細胞型類白血病。 第八十六頁，共一百二十五頁。3中性粒細胞的核象變化(nuclear

15、 shift)(2)核右移(shifttotheright)：外周血中性分葉核粒細胞增多，并且5葉核以上的中性粒細胞3時稱為核右移。核右移嚴重者常伴白細胞總數減少，反映造血功能衰退，與缺乏造血 物質、DNA合成障礙和骨髓造血功能減退有關。 第八十七頁，共一百二十五頁。第八十八頁，共一百二十五頁。異型淋巴細胞：在病毒或過敏原刺激下，可使淋巴細胞增生，并出現某些形態學變化，稱為異型淋巴細胞。周圍血中的異型淋巴細胞主要是T淋巴 異型淋巴細胞第八十九頁，共一百二十五頁。 I型(空泡型，漿細胞型)：最多見。胞體比正常淋巴細胞稍大，多為圓形、橢圓形或不規那么形。核圓形、腎形或分葉狀，常偏位。染色質粗糙，呈

16、粗網狀或小塊狀，排列不規那么。胞質豐富，染深藍色，含空泡或呈泡沫狀。第九十頁，共一百二十五頁。第九十一頁，共一百二十五頁。 型(不規那么型，單核細胞型)：胞體較大，外形常不規那么，可有多數偽足。核形狀及結構與I型相同或更不規那么，染色質較粗糙致密。胞質豐富，染淡藍或灰藍色，有透明感，邊緣處著色較深，一般無空泡，可有少數嗜天青顆粒。第九十二頁，共一百二十五頁。第九十三頁，共一百二十五頁。型(幼稚型)：胞體較大，核圓形或卵圓形。染色質細致呈網狀排列，可見12個核仁。胞質深藍色，可有少數空泡。 第九十四頁，共一百二十五頁。第九十五頁，共一百二十五頁。衛星核淋巴細胞 理化因素對細胞的損傷，致畸、致突變

17、的客觀指標之一第九十六頁，共一百二十五頁。巨多分葉核中性粒細胞：細胞直徑達1625m ，核分葉常在5葉以上，甚至在10葉以上，核染色質疏松。常見于巨幼細胞貧血、抗代謝藥物治療后。中性粒細胞的核形態異常第九十七頁，共一百二十五頁。異常粒細胞形態第九十八頁，共一百二十五頁。棒狀小體：在血涂片中，白細胞胞質中出現呈紫紅色細桿狀物質，長約16m，1條或數條不定，稱為棒狀小體。早幼粒細胞白血病(M3型) ,急性單核細胞白血病均可出現。而在急性淋巴細胞白血病中那么不出現。第九十九頁，共一百二十五頁。 2、棒狀小體(Auer body)：在Wright或Giemsa染色的血涂片中，白細胞胞質中出現呈紫紅色細

18、桿狀物質，長約16m，1條或數條不定，稱為棒狀小體。 這種棒狀小體只出現在白血病細胞中，故見到棒狀小體就可確診為急性白血病。急性粒細胞白血病呈粗短棒狀，急性單核細胞白血病呈細而長的棒狀小體。急性淋巴細胞白血病中不出現棒狀小體。第一百頁，共一百二十五頁。異常粒細胞形態第一百零一頁，共一百二十五頁。血小板假性減低：如血小板冷凝集、異常蛋白血癥、巨血小板、血小板衛星現象、高脂血癥、乙二胺四乙酸誘導的血小板聚集。假性血小板增高：可來自白細胞和紅細胞的碎片、小紅細胞，冷球蛋白血癥、瘧疾等。正常血小板具有異質性 ：正常血小板大小、形態之間變異較大。第一百零二頁，共一百二十五頁。一、血小板計數 血小板計數(

19、plateletcount，PLT)是測定全血中血小板的濃度，是止血凝血檢查最常用的試驗之一。血小板功能：維持血管內皮完整性和黏附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮。檢測原理 PLT的測定原理與血液紅(白)細胞計數相似(見表2-54)。 第三節 血小板檢查第一百零三頁，共一百二十五頁。檢測原理第一百零四頁，共一百二十五頁。普通光學顯微鏡直接計數法的方法學評價第一百零五頁，共一百二十五頁。第一百零六頁，共一百二十五頁。血小板體積小，其形態的識別，特別容易受其他雜物的干擾。血小板在體外易于粘附、聚集和變性破壞。血小板計數的質量控制原那么是：防止血小板的激活和破壞，防止雜物污染。質量控制第一百零七頁，共一

20、百二十五頁。 1.必須注意整個實驗前、中、后各個環節 2.由經驗豐富的檢驗人員復查核對血小板 計數結果 3.排除非技術因素的干擾第一百零八頁，共一百二十五頁。 方法學評價3相差顯微鏡直接計數法 易于識別，還可照相后核對計數結果，作為手工法血小板計數的參考方法。 4普通光學顯微鏡直接計數法草酸銨稀釋液：破壞紅細胞能力強，血小板形態清晰易辨，為首選稀釋液法；復方尿素稀釋液：使血小板脹大后易識別，但尿素易分解，不能完全破壞紅細胞；高鐵氰化鉀稀釋液：不能完全破壞紅細胞 。第一百零九頁，共一百二十五頁。參考值 (100300)X109L。 臨床意義 生理性變化午后略高于早晨；春季較冬季低；平原居民較高原

21、居民低；月經前減低，月經后增高；妊娠中晚期增高，分娩后減低；運動、飽餐后增高，休息后恢復；靜脈血血小板計數比毛細血管高10第一百一十頁，共一百二十五頁。病理性變化：血小板減低是引起出血常見原因。血小板在(2050)X109L時可，可有輕度出血或手術后出血；低于20X109L，可有較嚴重的出血；低于5X109L時，可導致嚴重出血。血小板計數超過400X109L為血小板增多。 病理性血小板減少和增多的原因及意義見表255。第一百一十一頁，共一百二十五頁。第一百一十二頁，共一百二十五頁。二、血小板形態檢查(一)正常血小板形態 正常血小板(normalplatelet)呈兩面微凸的圓盤狀，直徑約153

22、pm，新生血小板體積大，成熟者體積小。在血涂片上往往散在或成簇分布，其形態多數為圓形、橢圓形或略欠規那么；胞質呈淡藍或淡紅色，中心部位有細小、分布均勻而相聚或分散于胞質中的的紫紅色顆粒。第一百一十三頁，共一百二十五頁。正常血小板形態 第一百一十四頁，共一百二十五頁。 (二)異常血小板形態 1、大小異常 大血小板：常為7-20m,胞漿中嗜天青顆粒細小或融合為大顆粒,主要見于特發性血小板減少性紫癜,粒細胞白血病、血小板無力癥。小血小板：直徑小于1.5m,主要見于缺鐵性貧血、再生障礙性貧血等。第一百一十五頁，共一百二十五頁。2形態異常 血小板可以出現桿狀、逗點狀、蝌蚪狀、蛇形和絲狀突起等不規那么和畸形血小板，正常人偶見。影響血小板形狀改變因素很多，各種形態異常又無特異性，因此不規那么和畸形的血小板比值超過10時才有臨床意義。第一百一十六頁，共一百二十五頁。(1)血小板顆粒減少：血小板胞質內嗜天青顆粒減少或無顆粒，胞質灰藍或淡藍色。見于骨髓增生或骨髓增生異常綜合征。血小板顆粒減少也可偶見于EDTA抗凝血血涂片中。 (2)血小板衛星現象：血小板黏附、圍繞于中性粒細胞(或偶爾黏附于單核細胞)的現象(見以下圖),有時可見血小板吞噬現象。血小板衛星現象是血液分析儀血小板計數假性減少的原因之一(血小板被誤計為白細胞數)。第一百一十七頁，共一百二十五頁。